Quines informacions ens proporciona el diagnòstic dels espermatozoides segons el mètode FISH?

El mètode FISH de diagnòstic dels espermatozoides permet de detectar anomalies cromosòmiques (aneuploïdies), que constitue una causa important d'infertilitat masculina, d'errors de gestació i d'errors de FIV, i ajuda a triar la millor estratègia de tractament.

Principis fonamentals del mètode

La FISH, o hibridació in situ en fluorescència, és un mètode modern de citogenètica molecular utilitzat per a diagnosticar els factors genètics de l'infertilitat masculina. La seva importància és inestimable, ja que un spermiograma estàndard només dóna una idea superficial de la fertilitat masculina. El spermiograma registra certes el nombre d'espermatozoides, la seva mobilitat, les seves característiques morfològiques, detecta l'aglutinació de cèl·lules (aglutinitat) i altres indicadors, però no reflecteix l'estat de l'ADN dels espermatozoides ni la composició cromosòmica. Aquests indicadors són de gran importància per a la concepció i el naixement d'un nen sa.

Per això, una exàmen complet del factor masculí de l'infertilitat ha de incloure mètodes addicionals, entre els quals l'anàlisi FISH ocupa un lloc particular. El seu objectiu principal és d'avaluar el cariotip dels espermatozoides i de detectar la presència d'aneuploïdia, és a dir, anomalies en el nombre de cromosomes. Per a això, s'utilitzen sondes d'ADN especials marcades amb colorants fluorescents que permeten visualitzar els cromosomes al microscopi.

El patrimoni cromosòmic dels espermatozoides i la importància de les aneuploïdies

Normalment, els espermatozoides són cèl·lules haploides que contenen 23 cromosomes, és a dir, exactament la meitat del material genètic humà. No obstant això, el procés de formació dels espermatozoides (gametogènesi) no és perfecte. En cada home, un cert percentatge d'espermatozoides presenta anomalies cromosòmiques. Si aquest percentatge supera la norma fisiològica, això pot conduir a greus problemes de reproducció.

El conjunt de proves FISH inclou generalment l'estudi dels cromosomes sexuals (X i Y), així com d'autosomes 13, 18 i 21, ja que són els que més sovint s'associen a syndromes coneguts: Klinefelter (XXY), Turner (X), Patau (trisomía 13), Edwards (trisomia 18) i Down (trisomia 21). Si cal, el espectre de l'anàlisi es pot ampliar, per exemple afegint els cromosomes 16 i 22 en cas de sobretot recurrent o examinant els cromosomes en què s'han detectat anomalies del cariotip en l'home.

Com es realitza l'anàlisi FISH?

L'examen es realitza a partir d'una mostra d'esperma que el pacient proporciona després d'un període mínim d'abstinència (normalment 3 dies). La tècnica inclou diversos passos successius:

1. Fixació dels espermatozoides en una làmina de microscopi.
2. Desnaturalització de l'ADN: procés pel qual es destrueixen les unions de pont d'hidrogen entre els fils d'ADN i la molècula es converteix en monocatèndrica.
3. Hibridació de sondes d'ADN fluorescents amb llocs cèrters dels cromosomes.
4. Eliminació de les sondes en excés i_coloració de l'procediment.
5. Visualització dels senyals obtinguts sota un microscopi de fluorescència i interpretació.

Els espermatozoides normals emeten un sol senyal fluorescent per a cada cromosoma examinat. Tot desviament respecte a aquesta norma indica una aneuploïdia.

Indicacions per a l'examen

L'anàlisi FISH s'utilitza en els casos en què sigui necessari una avaluació més aprofundida de l'estatus genètic de l'home:

• L'home té més de 40 anys.
• Presència d'anomalies pronunciadament en els paràmetres del spermiograma.
• Sovidances, parades en el desenvolupament fetal o avortaments recurrents.
• Anomalies cromosòmiques diagnosticades en el fetus en embarassos anteriors.
• Intentos recurrents i infructuosos de FIV Fertilització in vitro i absència d'implantació després del trasllat d'embrions.
•  

Els homes que presenten una taxa alta d'aneuploïdia segons els resultats de l'anàlisi tenen un risc important de formar embrions amb anomalies genètiques, la qual cosa redueix les possibilitats d'implantació, augmenta el risc d'avortaments i la possibilitat de tenir un nen amb una anomalía en el cariotip.

Vincle amb la FIV Fertilització in vitro i PGT-A

Si es detecten nivells elevats d'anomalies cromosòmiques en el semen d'un home, el pas següent és realitzar una prova genètica preimplantacional (PGT-A) sobre els embrions. En combinació amb els programes de FIV, això permet seleccionar un embrió euploïde per al trasllat, augmentant signficativament les possibilitats d'embaràs i de naixement d'un nen sa. Per això, l'anàlisi FISH s'integra estretament amb els mètodes moderns de medicina reproductiva assistida i constitueix un element important de l'enfocament personalitzat del tractament de l'infertilitat.

Al nostre blog, hem abordat la qüestió « Què cal saber sobre el cribratge genètic preimplantacional (PGT-A)? »

Avantatges del mètode

• Millora del diagnòstic i del tractament de l'infertilitat. Els resultats de l'anàlisi ajuden els metges a triar els mètodes òptims, incloent ICSI i FIV amb PGT-A.
• Reducció de riscos genètics. Proporciona informació precisa sobre la probabilitat de transmissió d'anomalies cromosòmiques a la descendència.
• Protocols personalitzats. Possibilitat de crear un programa de tractament individualitzat.
• Millora de l'eficiència dels programes de PMA. Millora la selecció d'embrions amb alta viabilitat.
• Invasivitat mínima. La tècnica es realitza a partir d'una mostra d'esperma sense procediments complexos.

Limites del mètode

Malgrat la seva gran valua, la FISH també presenta alguns límits:

• El nombre d'espermatozoides examinats és limitat, cosa que crea el risc de passar per alt anomalies rares.
• Tot i que els resultats són normals, altres factors d'infertilitat no poden ser exclosos.
• El mètode requereix equipament especialitzat i personal experimentat.

Dades interessants

• El nom FISH significa «Fluorescència in situ per hibridació» (hibridació in situ per fluorescència). Metafòricament se'l coneix com «peix», perquè les sondes «Naveguen» i s'uneixen als cromosomes, creant senyals lluminosos brillants.
• Aquesta tecnologia s'utilitza no només en medicina reproductiva, sinó també en oncologia per al diagnòstic de cèl·lules canceroses, així com en altres camps de la genètica molecular.
• La FISH és un complement important als mètodes citogenètics tradicionals, ja que permet detectar més ràpidament i amb més precisió anomalies que poden passar desapercebudes amb els enfocaments estàndard.

L'anàlisi FISH dels espermatozoides continua sent una de les eines clau de la medicina reproductiva i de la genètica. Gràcies a la seva precisió, riquesa informativa i eficàcia, ajuda els metges i els pacients a prendre decisions informades, a millorar els resultats dels programes de FIV (fertilització in vitro) i a aconseguir el naixement d'infants sans.